ПОЛУЧЕНИЕ КАЛЛУСНЫХ КУЛЬТУР ПОЛЫНИ ОБЫКНОВЕННОЙ (ARTEMISIA VULGARIS L.) 

Кучарова Елена Валериевна, ведущий инженер, учебно-научная лаборатория молекулярно-генетических и клеточных технологий, Институт естественных наук, Северо-Восточный федеральный университет имени М. К. Аммосова (Россия, г. Якутск, ул. Кулаковского, 48), E-mail: oleneek@mail.ru
Охлопкова Жанна Михайловна, кандидат биологических наук, доцент, биологическое отделение, Институт естественных наук, Северо-Восточный федеральный университет имени М. К. Аммосова (Россия,  г. Якутск, ул. Кулаковского, 48), E-mail: zhm.okhlopkova@s-vfu.ru
Антонова Елена Евгеньевна, студентка, Северо-Восточный федеральный университет имени М. К. Аммосова (Россия, г. Якутск, ул. Кулаковского, 48), E-mail: jelena26.jl@gmail.com 

58.085 

DOI

10.21685/2307-9150-2020-1-1 

Актуальность и цели. Одним из альтернативных источников получения биологически активных веществ является культура растительных клеток in vitro. Целью данной работы является введение в каллусную культуру Artemisia vulgaris L. центрально-якутской популяции как вида с высоким содержанием различных биологически активных веществ, применяемого в народной медицине и широко распространенного на территории исследования.
Материалы и методы. Фитомасса Artemisia vulgaris L. была собрана во время экспедиций на территории Амгинского района Республики Саха (Якутия) в июне-июле 2016–2018 гг. Для введения Artemisia vulgaris в каллусную культуру в качестве инициальных эксплантов использованы настоящие листья стерильных растений, полученных в контролируемых условиях из семян дикорастущего растения. Культивирование проводили на питательной среде Мурасиге-Скуга с использованием двух разных вариантов регуляторов роста: 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты и кинетина, 6-бензиламинопурина и α-нафтилуксусной кислоты. Морфологический анализ клеток полученных каллусов проводили на световом микроскопе. Полученные первичные каллусы были отобраны для дальнейшей пересадки на питательной среде Мурасиге-Скуга (МС) с разными концентрациями регуляторов роста. Динамику роста сырой массы каллусов изучали в течение одного цикла (21 сут).
Результаты. Биомасса первичного каллуса Artemisia vulgaris на питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты и кинетина была светло-желтой окраски и плотной консистенции, а при добавлении 6-бензиламинопурина и α-нафтилуксусной кислоты также была бледно-желтой окраски, но отличалась легко отделяемой рыхлой структурой. Морфологический анализ клеток полученных первичных каллусов показал преобладание клеток округло-яйцевидной формы с ярко выраженным ядром. На питательной среде с добавлением 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты, кинетина и α-нафтилуксусной кислоты максимальное увеличение сырой массы каллуса наблюдалось на 11-е сут после пересадки. На питательной среде с добавлением 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты, α-нафтилуксусной кислоты и 6-бензиламинопурина максимальное увеличение сырой массы каллуса наблюдалось на 14-е сут.
Выводы. Получены первичные каллусы Artemisia vulgaris L. из листовых эксплантов, взятых из стерильных растений. Оптимизирована питательная среда с регуляторами роста для получения и дальнейшего введения каллусной культуры Artemisia vulgaris L. На питательной среде с добавлением 2,4-Д, НУК и БАП сырая биомасса каллуса Artemisia vulgaris L. в три раза превышает биомассу каллуса, получаемого на питательной среде с 2,4-Д, кинетином и НУК. Полученные каллусные культуры обладали мягкой легко отделяемой рыхлой структурой бледно-желтого цвета. 

Ключевые слова

Artemisia vulgaris L., каллусная культура, питательная среда MС, каллусогенез, биомасса, кривая роста 

 Скачать статью в формате PDF

1. Красноборов, И. М. Artemisia L. – Полынь / И. М. Красноборов // Флора Сибири : в 14 т. / под ред. Л. И. Малышева, Г. А. Пешковой. – Новосибирск : Наука, 1997. – Т. 13. – 472 с.
2. Захарова, В. И. Разнообразие растительного мира Якутии / В. И. Захарова. – Новосибирск : Изд-во СО РАН, 2005. – 328 с.
3. Данилова, Н. С. Краткий обзор полыней центральной Якутии / Н. С. Данилова, С. З. Борисова, Н. С. Иванова // Вестник Северо-Восточного федерального университета имени М. К. Аммосова. – 2011. – Т. 8, № 1. – С. 11–17.
4. Иванова, Н. С. Декоративные растения Якутии : атлас-определитель / Н. С. Иванова, Н. С. Данилова, С. З. Борисова. – Москва : Фитон+, 2012. – 248 с.
5. Фитохимическая характеристика полыни обыкновенной Artemisia vulgaris L., произрастающей на территории Бурятии / С. В. Жигжитжапова, Т. Э. Соктоева, Л. Д. Раднаева, В. В. Тараскин, Б.-Ц. Б. Намзалов // Вестник Бурятского государственного университета. – 2012. – № S3. – С. 74–77.
6. Govindaraj, S. Mass propagation and essential oil analysis of Artemisia vulgaris / S. Govindaraj, B. D. Kumari, P. L. Cioni, G. Flamini // Journal of bioscience and bioengineering. – 2008. – Vol. 105 (3). – P. 176–183.
7. Федоров, А. А. Химический состав уерэ ото (Artemísia vulgáris L.) как пищевого и лекарственного растения Якутии / А. А. Федоров, М. И. Ефремова, Н. К. Чирикова // Фундаментальные исследования. – 2014. – № 11-9. – С. 1981–1983.
8. Бутенко, Р. Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнологии на их основе : учеб. пособие / Р. Г. Бутенко. – Москва : ФБК-ПРЕСС, 1989. – 160 с.
9. Borzabad, R. In vitro Plant Regeneration from Leaf Explants of Artemisia vulgaris L. – A Medicinal Herb / R. Borzabad, M. Sudarshana, M. Niranjan // Modern Applied Science. – 2010. – Vol. 4 (9). – DOI 10.5539/mas.v4n9p130.
10. Kumar, S. Effect of Amino Acids and Growth Regulators on Indirect Organogenesis in Artemisia vulgaris L. / S. Kumar, B. Kumari // Asian Journal of Biotechnology. – 2010. – Vol. 2 (1). – P. 37–45. – DOI 10.3923/ajbkr.2010.37.45.
11. Hedayati, N. Survey of Callogenesis by Two Artemisia Species (Artemisia Vulgaris and Artemisia Deracunculus) / N. Hedayati, R. Hosseini, B. Hedayati // Iranian Journal of Pharmaceutical Research. – 2013. – Vol. 12. – P. 684.